1 相思子毒素的毒性及性质
1.1 相思子毒素的毒性
相思子毒素是从豆科藤本植物相思子(Abrusprecatorius)的种子中提取的一种剧毒性高分子蛋白毒素,其含量约占种子2.8%~3.0%。相思子毒素存在4种同族毒素(isoabrins),即abrin-a、abrin-b、abrin-c、和abrin-d,相对分子质量介于63 ku~67 ku之间,它们由不同的基因所编码,但同属于一个多基因家族;其中abrin-b、abrin-c由于其B链凝集活性低而只有较弱的细胞毒性作用;而abrin-a、abrin-d则有极强的细胞毒性,小鼠的LD50为0.04 μg/kg ,成年人摄入的致死剂量为0.1 μg/kg~1.0 μg/kg ,其毒性强度是蓖麻毒素(小鼠LD50 3.0 μg/kg)的70 多倍,已被列为潜在的重要毒素战剂和生物恐怖病原物质之一 。(WUQI.TTcX.NET)
相思子毒素中毒后,通常要经数小时至数天的潜伏期才出现综合征。可表现为口腔灼烧感、吞咽困难、恶心、呕吐、血痢、腹部痉挛性疼痛、昏睡、定向障碍、惊厥、黏膜发绀、昏迷、循环衰竭、视网膜出血、血尿和少尿等症状。经静脉注射或皮下给药,临床症状与经消化道给药相似,但胃肠道症状较轻,而注射部位通常会发生严重的炎症 。武器大全wuQI.ttcX.nET编辑
1.2 相思子毒素的物理性质
纯化后的相思子毒素为微黄白色无定形粉末,无味,易溶于水、氯化钠和甘油溶液,不耐热。60 ℃经30 min部分失活,80 ℃经30 min则大部分失活,100 ℃经30 min毒性及抗肿瘤活性完全消失。印度安达曼岛上居民将相思子种子煮熟后作为食物食用。完整的相思子毒素经反复冰冻和融化对其毒性影响很小。在0.1 mol/L半乳糖溶液中,毒素可在冰箱中储存数月而不会失活。分离开的链要比完整毒素更不稳定 。(TtCX.net)
2 相思子毒素的结构
2.1 相思子毒素的一级结构
相思子毒素是一种分子质量约为63 ku~67 ku的糖蛋白,分子由A 、B两条多肽链通过1个二硫键连接而成。完整毒素在 SDS- PAGE分析时呈一条蛋白带,经二巯基乙醇处理后,A、B两条链分离开,其中A链呈酸性,分子质量约为30 ku,与蓖麻毒素A链存在102个相同的氨基酸残基;B链呈中性,分子质量约35 ku。有关试验表明,相思子毒素两条链经二巯基乙醇还原分离开后,其活性并不丧失。
与蓖麻毒素相似,相思子毒素也是以前体蛋白形式表达,编码前体相思子毒素的基因组不含内含子,从5′端到3′端分别编码由34个氨基酸残基组成的前导序列,250个或251个氨基酸残基组成的A链,10个氨基酸残基组成的连接肽,267个或268个氨基酸残基组成的B链 。34个氨基酸残基组成的前导序列很可能包含一个信号肽,诱导前体进入内质网,进行翻译后加工,然后再转运到种子蛋白储存部位,推测信号序列的切点位于第19位的Ser羧基端。
相思子毒素所含的糖基主要存在于B链上,糖的类型为甘露糖和N-乙酰葡萄糖胺,毒素经糖基修饰后,可以增加其自身结构的稳定性,防止降解,增强对极端条件的适应性 。目前已阐明了Abrin-a 的B链的2个糖基化位点附近的氨基酸序列及糖链结构,糖肽附近的氨基酸顺序为Asp-Asn(CHO)-Gly-Thr ,Gly-Asn(CHO)-Asn ,其序列分别类似于Ricin-D的B链Asp94-Asn(CHO)-Gly-Thr97,Thr134 –Asn (CHO)-Asn136。